Resumen de Desarrollo de un sensor nanomecánico para estudios de adsorción de moléculas biológicas y reconocimiento molecular
El objetivo principal de esta Tesis ha sido el desarrollo, caracterización y aplicación de un biosensor nanomecánico basado en micropalancas. Las principales ventajas de este tipo de sensores radican en su alta sensibilidad teórica, el pequeño tamaño del área sensora (1000 m2), la lectura directa sin necesidad de marcadores, su compatibilidad con la tecnología microelectrónica que permite la fabricación de matrices de micropalancas y su capacidad de integración para conseguir microsistemas portátiles.
El trabajo realizado puede dividirse en dos partes:
En la primera se ha desarrollado un biosensor nanomecánico basado en una micropalanca y se ha estudiado su respuesta mecánica ante dos tipos de reconocimientos biomoleculares diferentes, la interacción entre un antígeno y un anticuerpo y la hibridación entre cadenas de ADN. Con el fin de optimizar el dispositivo se ha realizado una caracterización de las micropalancas en función de sus dimensiones.
En la segunda parte se ha desarrollado una plataforma de lectura simultánea de varias micropalancas y se ha demostrado su funcionamiento tanto en modo estático como dinámico, aplicándose posteriormente, a la caracterización de matrices de micropalancas.
La primera aplicación llevada a cabo con este biosensor es la detección con alta sensibilidad del reconocimiento molecular de anticuerpos monoclonales específicos del pesticida DDT. Para ello se ha controlado en tiempo real la funcionalización de una de las superficies de la micropalanca con el hapteno del pesticida. Esta activación ha sido realizada mediante la técnica de monocapas auto-ensambladas, incluyendo la formación de múltiples capas con el fin de obtener la configuración adecuada para inmovilizar el receptor. Se ha demostrado la capacidad del dispositivo para detectar concentraciones de anticuerpo menores a 5g/ml, así como la posibilidad de regeneración de su superficie sin pérdida de efectividad en reconocimi
