Análisis de las proteínas nucleolares NopA100 y NopA64 en Allium cepa

• Autores: Fernando González Camacho
• Directores de la Tesis: Francisco Javier Díaz Medina (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Autónoma de Madrid ( España ) en 2004
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Amparo Cano Garcia (presid.), Marta Martín Basanta (secret.), Consuelo De la Torre García (voc.), Ana María Vázquez López (voc.), José Manuel Echevarría Mayo (voc.)
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  • Tesis en acceso abierto en: Biblos-e Archivo
• Resumen

  • En este trabajo se han analizado las propiedades físico-químicas de las proteínas nucleolares NopA100 y NopA64, que son mayoritarias en la fracción soluble de los núcleos de células en proliferación, aunque también presentan niveles significativos en la fracción más insoluble (matriz nuclear).

    Las proteínas mostraron un incremento en la fase G2 del ciclo celular.

    Mediante inmunocitoquímica a nivel de microscopía óptica y electrónica, se observó una distribución desigual dentro del nucleolo, apareciendo principalmente en los componentes fibrilares. Un análisis mediante Western blot con anticuerpo anti-NopA100 mostró una banda principal a 100 kDa junto con una serie de proteínas relacionadas con ella, de menor tamaño. Este resultado sugiere que la NopA100 sufre un proceso fisiológico de maduración proteolítica, lo que fue confirmado mediante un tratamiento con un inhibidor de proteasas general, la leupeptina. Se observó una relación entre el incremento de la actividad del nucleolo y la actividad de la NopA100, el progreso en el ciclo celular y la maduración de la proteína.

    Hemos demostrado que las variaciones de la NapA100 durante la progresión del ciclo celular van acompañadas de una reorganización estructural del nucleolo, que es expresada en cambios cuantitativos de la contribución relativa de los diferentes subcomponentes nucleolar para cada uno de los períodos de la interfase.

    El conjunto de sus propiedades identifica a la NopA100 como una proteína homóloga a la nucleolina de mamíferos y a la NopA64 como un fragmento estable de la NopA100. Este hecho, junto con el análisis detallado de las secuencias de aminoácidos del resto de "proteínas semejantes a nucleolina" en otros organismos, confirma la alta conservación evolutiva que presenta, la cual es la consecuencia del papel funcional extraordinariamente relevante de esta proteína en la vida de la célula, interviniendo decisivamente en la re