Poxvirus vaccine strategies to improve T cell responses: Neutrophil immunomodulation & promoter modification

• Autores: Mauro Di Pilato
• Directores de la Tesis: Mariano Esteban Rodríguez (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Autónoma de Madrid ( España ) en 2015
• Idioma: inglés
• Tribunal Calificador de la Tesis: Francisco Sánchez Madrid (presid.), Santiago Fernández González (secret.), José Mario Mellado García (voc.), Rafael Blasco Lozano (voc.), Margarita del Val Latorre (voc.)
• Materias:
  • Ciencias de la vida
    • Inmunología
      • Vacunas
    • Virología
      • Poxvirus
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: Biblos-e Archivo
• Resumen

  • El virus vaccinia está siendo utilizado como vector vacunal en varias enfermedades animales y humanas. La capacidad de inducir una respuesta de células T específicas fretne a los antígenos exógenos constituye la mejor propiedad inmune de este virus que genera protección frente a distintos patógenos. MVA y NYVAC, con capacidad reducida de replicación en las células humanas, representan los vectores más utilizados del virus vaccinia en ensayos clínicos.

    Este trabajo se dirige hacia la comprensión de los mecanismos involucrados en la generación de respuestas inmunes específicas hacia antígenos y a la mejora de la capacidad de inducir esta respuesta por parte de los poxvirus. En este sentido, hemos desarrollado diferentes estrategias y distintos candidatos vacunales del virus vaccinia para mejorar las respuestas inmunes específicas hacia antígenos heterólogos.

    Hemos modificado el vector NYVAC-C, que expresa antígenos del virus VIH-1 de subtipo C, mediante deleción de genes (A52R, K7R, B15R) para enfocarnos en la vía de señalización de NF¿B en la célula huésped. Se encontró que estos genes actúan conjuntamente para inhibir la vía de señalización de NF¿B, descartando la sinergia entre estas proteínas como modo de acción. Se estudió la capacidad de este virus recombinante de inducir respuestas inmunes innatas que dependen de NF¿B y se demostró que los neutrófilos aumentan las respuestas inmunitarias adaptativas de células T hacia antígenos de VIH. Definimos el tráfico de neutrófilos desde el sitio de infección hacia diversos órganos linfoides secundarios y describimos que después de la estimulación por quimiocinas, los neutrófilos polarizan hacia fenotipos funcionales distintos que regulan la magnitud y la calidad de la respuesta inmune.

    Hemos generado nuevos promotores del virus vaccinia para mejorar la expresión de los antígenos GFP y LACK de Leishmania y aumentar las respuestas de células T específicas hacia estos antígenos. Tras el análisis bioinformático, se definió una nueva secuencia del promotor para mejorar los niveles de expresión temprana del antígeno GFP. Por otra parte, hemos modificado la longitud del espaciador del promotor para aumentar la expresión de estos dos antígenos heterólogos. Los vectores recombinantes de MVA con estas modificaciones en el promotor aumentaron la expresión del gen heterólogo y positivamente influyeron en la magnitud y la calidad de las respuestas de memoria de células T específicas. Estos resultados proporcionan importantes conocimientos sobre el mecanismo de la respuesta inmune inducida por el virus vaccinia y estrategias alternativas para el diseño de vectores vacunales.