Clonado de los genes bla cromosómicos de Yersinia enterocolítica

• Autores: Asunción Seoane Seoane
• Directores de la Tesis: Juan María García Lobo (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidade de Santiago de Compostela ( España ) en 1989
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Isabel Bernárdez Hermida (presid.), Manuel Veiga Aneiros (secret.), M. Carmen Rodríguez Pérez (voc.), Jesús Navas Méndez (voc.), Jesús Agüero Balbín (voc.)
• Materias:
  • Química
    • Bioquímica
      • Biología molecular
  • Ciencias de la vida
    • Genética
      • Ingeniería genética
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• Resumen

  • A pesar de que habitualmente las bacterias gram-negativas codifican una sola b-lactamasa cromosómica especie-específica, las cepas de “Y.enterocolitica” serotipo 0:3 producen dos tipos diferentes: a y b. El gen que expresa la b-lactamasa a fue clonado desde el cromosoma de la cepa y-56, este gen se expresa eficientemente en “ E. coli “ siendo su expresión constitutiva e independiente de la temperatura. La b-lactamasa a de amplio espectro que hidroliza la carbenicilina, posee un peso molecular de 26.000 daltons y un punto isoeléctrico de 8.7. El gen blab es expresado de manera muy deficiente por la cepa y-56 por lo que fue clonado desde la cepa ip97 perteneciente al serotipo 0:5b que expresa solamente la b-lactamasa b. Este gen blab se expresa eficientemente en “ E.coli “, su expresión es inducible e independiente de la temperatura. La b-lactamasa b es una cefalosporinasa típica que posee un peso molecular de 39.000 daltons y un punto isoeléctrico de 5.7. Curiosamente ambas cepas de “ Y. enterocolitica “ presentaron copias de ambos genes bla en sus cromosomas pareciendo idénticas ambas cepas en el loculs blab, a pesar de que la cepas y-56 expresa mal la b-lactamasa b y en el locus blaa, en la cepa ip97 se observa un cambio que afecta a un sitio hincii que impide la expresión del gen blaa. Los genes blaa y blab no son significativamente homólogos y probablemente no están próximos en el cromosoma de “ Y.enterocolitica”. A nivel evolutivo el gen blab esta próximo al gen ampc de “ C. Freundii “y “ E. cloacae “ y alejado del gen ampC de “ E. coli “ y “ S. marcescens “. El gen blaa está cercano al gen bla que expresa la kl b-lactamasa de” K. Pneumoniae “ y posiblemente dio origen a algunos de los genes que expresan b-lactamasas plasmídicas.