Tiorredoxinas de escherichia coli y saccharomyces cerevisiae: papel en la expresión génica en respuesta a estrés oxidativo
- Autores: Fernando Monje-Casas
- Directores de la Tesis: Carmen Pueyo (dir. tes.)
- Lectura: En la Universidad de Córdoba (ESP) ( España ) en 2003
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Francisco Castillo Rodríguez (presid.), José Ramos Ruiz (secret.), Enrique Herrero Perpiñan (voc.), Andrés Garzón (voc.), Francisco Javier Florencio Bellido (voc.)
- Materias:
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- Resumen
La tiorredoxina (Trx) es una proteína con un papel fundamental en la protección frente a estrés oxidativo. Trx actúa como una disulfuro oxido-reductasa, y su forma oxidada es reducida por NADPH a través de la acción catalítica de la flavoenzima tiorredoxina reductasa (TR). Trx, TR y NADPH forman el sistema Trx, que constituye un sistema general de reducción de disulfuros en proteínas. El sistema Trx , junto con el sistema de glutatión (GSH), regula el estado tiol-disulfuro del citoplasma.
En la presente tesis doctoral se han estudiado los patrones de expresión de genes de los sistemas Trx y GSH de E.coli y de S.cerevisiae.
Por ello, se aplicaron las metodologías de RT-PCR múltiple y de RT-PCR en tiempo real, que permiten la cuantificación de los niveles de transcrito con gran sensibilidad y repetitividad.
Los resultados obtenidos demuestran que los sistemas Trx y GSH de E.coli participan en la inactivación de OxyR, el regulador de la respuesta adaptativa a peróxido de hidrógeno en esta bacteria. Adicionalmente se comprueba que este factor de transcripción incrementa la expresión de genes de los sistemas Trx y GSH. De este modo, se propone un modelo de autorregulación del regulón OxyR.
Trx y Grx se aislaron como reductores de la ribonucleótido reductasa (Rrasa).
Se demuestra que la expresión del operón, nrdHIEF, que codifica la RRAsa de clase Ib de E.coli y su redoxina específica, puede ser vital bajo ciertas condiciones de crecimiento. Los niveles de transcrito de estos genes varían con la fase de crecimiento y la composición del medio. También se observa un incremento de su expresión como consecuencia de la deficiencia en componentes de los sistemas Trx y GSH y tras la exposición de estrés oxidativo.
En cuánto a S. Cerevisiae, el perfil transcripcional de los genes de los sistemas Trx y GSH de la levadura a lo largo de la curva de crecimiento indica que el programa de expresión génica por el ca
