Estudio descriptivo de alergia a larvas de calliphoridae y lombriz de tierra en pescadores de Cáceres. Identificación de especies y caracterización alergénica
- Autores: Sergio Porcel Carreño
- Directores de la Tesis: María Belén de la Hoz Caballer (dir. tes.), Mª Carmen Diéguez Pastor (codir. tes.)
- Lectura: En la Universidad de Alcalá ( España ) en 2008
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Agustín Albillos Martínez (presid.), Manuel Rodríguez Zapata (secret.), Fernando Pineda de la Losa (voc.), Emilio Álvarez Cuesta (voc.), Eloína González Mancebo (voc.)
- Materias:
- Enlaces
- Tesis en acceso abierto en: e_Buah
- Resumen
- español
El asticot es el cebo vivo más utilizado para la pesca deportiva de agua dulce en Extremadura, España. Hablamos de asticot (nombre originario de Francia) para referirnos a larvas de moscas de la familia Calliphoridae. Estas larvas son tan difíciles de identificar, que se usa de manera genérica el nombre de asticot, sin concretar la especie/s que la componen. Los géneros Lucilia y Calliphora tienen el mayor número de especies implicadas en reacciones alérgicas en pescadores aficionados o en trabajadores especializados. En 1982, Stockley y cols. describen el primer caso de hipersensibilidad a una larva de mosca perteneciente a la familia Calliphoridae, en un pescador con síntomas de urticaria de contacto y reacciones asmáticas tardías en relación con la manipulación de este cebo.
Objetivos: Estudiar los hábitos de pesca y describir la prevalencia de reacciones alérgicas en pescadores aficionados de Cáceres. Analizar la posibilidad de factores de riesgo para el desarrollo de alergia a Asticot. Identificación taxonómica de las especies comercializadas de asticot en tiendas especializadas de pesca.
Materiales y métodos: Se escogieron aleatoriamente 72 pacientes de la Sociedad de Pescadores de Cáceres, a los que se les realizaron cuestionarios clínicos basados en los cuestionarios epidemiológicos sobre enfermedades alérgicas ECRHS e ISAAC, con algunas modificaciones, incluyendo preguntas acerca de la historia personal o familiar de atopia, hábitos de pesca y la presencia de síntomas cutáneos o respiratorios en relación con el uso de cebo vivo de pesca. El mismo día, se procesaron muestras sanguíneas para la obtención de suero que fue congelado a -20ºC hasta su utilización para los estudios in vitro. Tras la extracción sanguínea se realizaron pruebas cutáneas en prick con extractos acuosos de asticot y lombriz de tierra local en todos los pacientes. Se realizaron determinaciones de IgE específica, en suero de los pacientes estudiados, frente a las especies implicadas, mediante técnica ELISA. Se realizaron extractos acuosos de especies larvarias importadas (Protophormia terraenovae, Callíphora vomitoria, Lucilia sericata) y Lumbricus terrestris, para su utilización en los estudios de ELISA y caracterización alergénica. La identificación de los principales alérgenos de las especies implicadas se realizó mediante estudios de SDS-PAGE e Inmunoblot usando sueros de pacientes alérgicos a cebo vivo (pacientes con síntomas alérgicos relacionados con el uso de cebo vivo junto con una prueba cutánea y/o IgE específica positiva a una o más de las especies estudiadas) Se realizaron estudios de ELISA e Inmunoblot inhibición con el objetivo de identificar posibles alérgenos responsables de reactividad cruzada entre las diferentes especies estudiadas. Se analizaron muestras de asticot de varias tiendas de la ciudad de Cáceres para su identificación taxonómica. Los datos fueron analizados utilizando el software estadístico SPSS 12.0.
Resultados: El análisis del tercer estadío larvario y de las moscas adultas de las muestras de asticot local obtuvo a la especie Protophormia terraenovae como la principal especie identificada. Las pruebas cutáneas en prick con el extracto de asticot local fueron positivas en 8 pacientes (11.1%). 4 pacientes dieron una respuesta positiva con el extracto de lombriz de tierra local (5.5%). Las pruebas cutáneas realizadas en pacientes control fueron negativas. Se realizaron mediciones de IgE específica en 68 pacientes. Se demostró la existencia de IgE específica frente a P. terraenovae en el 59% de los pacientes estudiados. Sólo se obtuvieron 3 resultados positivos frente a C. vomitoria, 2 frente a L. sericata y 1 frente a L. terrestris. 5 pacientes presentaban síntomas alérgicos en relación con el uso de asticot. Los síntomas más frecuentes eran de rinitis y conjuntivitis. Los pacientes pescaban habitualmente en fines de semana durante los meses de primavera y verano. Se pudo establecer una asociación entre la duración de la exposición y la sensibilización a asticot (p=0.0197). No se pudieron establecer factores de riesgo para el desarrollo de alergia a asticot. Los estudios de Inmunoblot IgE demostraron la existencia de 3 alérgenos principales en el extracto de P. terraenovae (15.3, 22.8 y 69.3 kDa), 5 en C. vomitoria y L. sericata (14, 26-27, 39-40, 44-45 y 72 kDa) y uno de 15.5 kDa en L. terrestris. Existía una banda alergénica de unos 14-15 kDa reconocida al menos por el 50% de los pacientes en las 3 especies de Califóridos y en L. terrestris. Los estudios de ELISA e Inmunoblot inhibición demostraron la existencia de reactividad cruzada, principalmente entre P. terraenovae y L. terrestris.
Conclusiones:
1. El asticot es la principal fuente de reacciones alérgicas por cebo vivo entre los pescadores de Cáceres.
2. El asticot disponible en tiendas de pesca de Cáceres está compuesto por larvas de P. terraenovae (Diptera. Calliphoridae).
3. La P. terraenovae parece tener un mayor potencial alergénico que otras especies de Califóridos y que la lombriz de tierra.
4. Un 7% de pescadores aficionados desarrollaron síntomas alérgicos como consecuencia del contacto con larvas de P. terraenovae.
5. Los síntomas más frecuentes, son la rinoconjuntivitis de presentación inmediata al contacto.
6. La duración de la exposición, en años, se relaciona con la sensibilización a asticot.
7. Existe reacticidad cruzada alergénica entre P. terraenovae y L. terrestris.
8. Los estudios de western blot muestran una intensa banda de reconocimiento IgE específico con un PM aproximado de 15-16 kDa, en los extractos de P. terraenovae y L. terrestris. Pensamos que dicho alérgeno podría corresponderse con el rango descrito para diversas hemoglobinas en dípteros y anélidos.
- English
Asticot maggot is the most important live fish bait used for angling in our country. Asticot, is a name native from France of the blowflie larvae (Calliphoridae family). These maggots are almost identical, and it is so difficult to distinguish that the name asticot is used without worrying about the exact species concerned. Calliphora and Lucilia species are implicated in the majority of respiratory allergy cases among amateur fishermen or occupationally exposed workers. In 1982, Stockley et al reported the first case of hypersensitivity to fly larvae belonging to Calliphoridae family in an angler with contact urticaria and late asthmatic responses associated with handling this maggot.
Objectives: Our objective was to study the fishing customs, prevalence and associated factors of asticot allergy, in population of amateur fishermen.
Materials and methods: 72 randomized selected patients (belonging to Angler’s Society of Cáceres) completed a specific questionnaire based in ECRHS and ISAAC questionnaires with some modifications, including questions about history of atopy, fishing habits and the presence of skin, upper and/or lower airway symptoms related with live fish bait handling. In the same day, blood samples were taken and processed to get serum and then stored at -20ºC. After blood test, skin prick test (SPT) with aqueous extracts of asticot and common earthworm were performed in all patients.
Specific IgE levels, as determined by ELISA method, were measured at the end of patient’s recruitment.
Aqueous extracts of imported larvae samples (appâts Bonnet S.A. France); Protophormia terraenovae, Calliphora vomitoria and Lucilia sericata larvaes, and Lumbricus terrestris, were used for ELISA and in vitro characterization of allergens. The main allergens in these species were identified by means of SDS-PAGE inmunoblot studies, using sera of live fish bait allergic patients (patients with symptoms related to fish bait handling together with positive skin prick test and/or specific IgE to one or more of the species tested). ELISA and blot inhibition studies were performed in order to identify possible cross-reactive allergens. Local asticot samples were obtained for taxonomic identification. Data were analysed using the Statistical Package for the Social Sciences (SSPS, version 12.0).
Results: Analysis of the 3th stage larvae and adult flies of local asticot samples, identified P. terraenoae as the main isolated specie. SPT to asticot extract was positive in 8 patients (11.1%), and 4 patients had positive SPT to common earthworm (5.5%). Negative responses were observed in controls. Specific IgE were tested in 68 patients. Sensitization to P. Terraenovae was found in 59% patients. Sensitization to C. vomitoria, L. sericata and L. terrestris only appears in 3, 2 and 1 patients respectively. Specific IgE to P. terraenovae showed more intense responses. 5 patients (7%) reported allergic symptoms caused by asticot maggots. Rhinitis and conjunctivitis were the most frecuent symptoms. Patients usually fish on weekends, during spring and summer. There was an association between duration of exposure (p=0.0197), and asticot sensitization. No associated factors for allergy to asticot could be observed. IgE immunoblotting identified 3 main allergens in P. terraenovae (15.3, 22.8 y 69.3 kDa), 5 main allergens in C. vomitoria and L. sericata (14, 26-27, 39-40, 44-45 y 72 kDa) and one of 15.5 kDa in L. terrestris. One allergenic band with approximately 14-15 kDa, was recognized at least by 50% of patients, to the 3 species of Calliphoridae larvae and L. terrestris. ELISA and blot inhibition studies demonstrated the presence of crossreactivity, mainly between P.terraenovae and L. terrestris.
Conclusions:
1. Asticot is the main allergenic source among our fishermen.
2. Commercially available asticot, in Cáceres, is composed by P. terraenovae larvae (Diptera. Calliphoridae).
3. P. terraenovae seems to be a more potent sensitizer than other Calliphoridae species and L. terrestris.
4. 7% of amateur fishermen develop allergic symptoms resulting from contact with asticot maggots.
5. The most common sypmtoms are rhinoconjunctivitis immediately in type.
6. Duration of exposure (in years) is associated to asticot sensitization.
7. There is allergenic cross-reactivity between P. terraenovae and L. terrestris.
8. Western blot assays show a dense IgE binding band of MW approximately 15-16 kDa, in extracts of P. terraenovae and L. terrestris. We think that these allergens could coincide with the range described for the hemoglobins
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