Resumen de The role of p19 C-H-Ras protein in metastasis and proliferative pathways
Roseli Marlen García Cruz
c-H-Ras es un proto-oncogen que codifica para dos proteínas por esplicing alternativo, llamadas la p19 y la p21 y a pesar de tener el mismo origen, ambas proteínas difieren en su tamaño y función. (1,2). En esta tesis doctoral hemos encontrado evidencias que sugieren que la proteína p19 c-H-Ras promueve a un estado anticancerígeno en la célula, mientras que la proteína p21 c-H-Ras induce la aparición de algunos aspectos del proceso maligno. La proteína p21 es de mayor tamaño que la proteína p19 y se localiza en la membrana en donde presenta la función de GTPasa y regula múltiples vías de señalización entre las cuales figuran RAS/PI3K/AKT (3-8); por otra parte, la proteína p19 es de menor tamaño y se localiza en la membrana nuclear, en donde forma complejos proteicos con otras proteínas tales como RACK1, P73 ¿/ß, pKCßII, (9-10). Las mutaciones en el gen H-Ras promueven la carcinogénesis y han sido frecuentemente detectadas en los tumores de los pacientes (30%) con melanoma, cáncer oral, de riñón y vejiga. Para nuestros experimentos evaluamos las siguientes líneas celulares: 1) células HeLa transfectadas en forma transiente, y que sobreexpresaban la secuencia de cada una de las proteínas H-Ras de nuestro interés en forma separada (vectores pRK5); 2) fibroblastos embrionarios de ratón knock-out H-Ras (-/-) y doble knock-out H-Ras (-/-), N-Ras (-/-), transfectados de manera estable con los vectores pEGFP-p19 ó pEGFP-p21 y 3) líneas de fibroblastos mutantes (G12S ó G12A) obtenidas de pacientes con Síndrome de Costello, el cuál es un raro desorden congénito causado por la activación en la línea germinal del oncogen H-Ras que afecta al codón 12 tanto a la proteína p19 como a la p21 (11-13). Nuestros resultados mostraron que las proteínas H-Ras promueven el incremento en la expresión de un grupo de microRNAs evaluados, y en forma diferencial y dramática, la expresión de la proteína p19 en los fibroblastos embrionarios de ratón knock-out H-Ras (-/-) incrementó la expresión de miR-206 e induce a la célula a entrar a un estado de quiescencia celular en la fase G0/G1 provocando una disminución en la proliferación celular; la disminución en la capacidad invasiva in vitro; menor formación en la producción de las especies reactivas de oxigeno y de tumores. Aunado a lo anterior, la sobreexpresión de la proteína p19, incrementa la expresión de la proteína NM23H1, la cuál confiere protección contra el daño producido al DNA por las especies reactivas de oxígeno. En cuanto a las líneas mutantes de los fibroblastos de los pacientes con Síndrome de Costello, detectamos que 1) la mutación G12S posee mayor capacidad invasiva que la G12A, y 2) además observamos una disminución en la expresión de miR-206, la cuál ha sido relacionada recientemente con la aparición de rabdomyosarcoma en los pacientes por tal motivo, este microRNA ha sido propuesto como un marcador del pronóstico de la enfermedad. REFERENCIAS 1. Cohen J.B., Broz S.D., and Levinson A.D. (1989). Expression of the H-Ras proto-oncogene is controlled by alternative splicing. Cell. 58: 461-472 2. Guil S, de La Iglesia N, Fernández-Larrea J, Cifuentes D, Ferrer JC, Guinovart JJ, Bach-Elias M. (2003a). Alternative splicing of the human proto-oncogene c-H-ras renders a new Ras family protein that trafficks to cytoplasm and nucleus.Cancer Res. (2003 a) 1;63(17):5178-87 3. Malumbres M., and Barbacid M. (2003). Ras oncogenes: the first 30 years. Nature Reviews 3,7-13. 4. 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