Ánalisis de la respuesta inmunitaria inflamatoria en la inflamación por el virus dengue y su significancia clínica

• Autores: Julia del Carmen Arias Puentes
• Directores de la Tesis: Melchor Álvarez de Mon Soto (dir. tes.), Nereida Valero Cedeño (codir. tes.), Eduardo Reyes Martín (codir. tes.)
• Lectura: En la Universidad de Alcalá ( España ) en 2011
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Agustín Albillos Martínez (presid.), Jorge Monserrat Sanz (secret.), Luis Berlanga González (voc.), José Antonio Girón González (voc.), Francisca Monsalve del Castillo (voc.)
• Materias:
  • Ciencias médicas
    • Patología
      • Inmunopatología
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: e_Buah
• Resumen
  • español

    El dengue es una enfermedad viral, de carácter endemo-epidémico, es la arbovirosis de mayor relevancia a nivel mundial en términos de morbilidad, mortalidad y afectación económica. Las citoquinas y apoptosis juegan un papel importante en la respuesta inmunitaria contra el virus dengue (DENV); sin embargo su presencia en la forma grave de la enfermedad no está del todo esclarecida. El objetivo del presente estudio fue evaluar el patrón de citoquinas pro-inflamatorias/anti-inflamatorias y el marcador de apoptosis TRAIL en pacientes con dengue y su significancia clínica, con énfasis en sus fases evolutivas, severidad, serotipo viral y tipo de infección. Además, se analizó el efecto del DENV sobre la producción de citoquinas en cultivo de CMNSP y la apoptosis en monocitos de pacientes con dengue e infectados a diferentes días con los serotipos del virus dengue. Al respecto, se determinó la concentración de las citoquinas pro-inflamatorias (factor de necrosis tumoral-[alfa] [TNF[alfa]], Interleucina 6 [IL-6], IL-1[beta], IL-12 e IL-17; anti-inflamatorias (receptor 1 del TNF soluble [sTNF-RI], sTNF-RII y la proteína 1 tipo receptor de interleucina-1 [IL1RL1/sST2]); y el marcador de apoptosis ligando inductor de apoptosis relacionado al factor de necrosis tumoral [sTRAIL] en treinta pacientes con dengue en fase aguda (FA), fase de recuperación precoz (FRP) y fase de recuperación tardía (FRT). Estos pacientes fueron clasificados según la severidad de la enfermedad por los criterios de OMS en dengue sin signos de alarma (DSSA), dengue con signos de alarma (DCSA) y dengue grave (DG); y según el tipo de infección en infección primaria (IP) e infección secundaria (IS). Se incluyeron dos grupos controles, diez sujetos sanos (control) y ocho con otra infección viral febril (OIVF). Los niveles circulantes de las citoquinas se determinaron por ELISA y la apoptosis por el método de TUNEL. Los cultivos de CMNSP fueron estimulados o no con LPS por 24 horas. Los datos fueron analizados por ANOVA seguido por el post-test de Bonferroni. Nuestros resultados evidencian un incremento significativo de la mayoría de las citoquinas pro- y anti-inflamatorias (TNF[alfa], IL-6, IL-12, IL-17, sTNF-RI, sTNF-RII, IL1RL1/sST2) y de sTRAIL en el suero de los pacientes con dengue en fase aguda de la enfermedad con respecto al grupo control. El aumento de IL-6, sTNF-RI, sTNF-RII y IL1RL1/sST2 fue asociado con la severidad de la enfermedad; mientras que IL-12 no se alteró durante la enfermedad severa. El incremento de sTRAIL fue evidente en la infección primaria. El patrón de secreción de las citoquinas TNF[alfa], IL-1[beta] e IL-17 en los monocitos circulantes infectados fue similar al comparar las concentraciones con las del grupo control sin estimulo. Asimismo, los niveles de IL-6 e IL-12 cursaron parecidas al grupo control. Los monocitos de pacientes con dengue sin LPS presentaron un aumento de las células apoptóticas (p<0,001) con respecto al control. Este incremento de las citoquinas y la apoptosis durante la enfermedad evidencia la participación del DENV en la activación y muerte del monocito in vivo.

  • English

    Dengue is a viral disease, of endemic-epidemic character, is the most important arbovirus diseases worldwide in terms of morbidity, mortality and economic impact. Cytokines and apoptosis play an important role in the immune response against dengue virus (DENV), yet its presence in the severe form of the disease is not completely understood. The aim of this study was to evaluate the cytokine pattern proinflammatory/anti-inflammatory and TRAIL apoptosis marker in patients with dengue and its clinical significance, with emphasis on developmental stages, severity, viral serotype and type of infection. In addition, we examined the effect of DENV on cytokine production in cultured PBMC and apoptosis in monocytes from patients with dengue and infected at different days with the dengue virus. In this regard, we determined the concentration of pro-inflammatory cytokines (tumor necrosis factor-α [TNF], interleukin 6 [IL-6], IL-1β, IL-12 and IL-17, anti-inflammatory (receptor 1 soluble TNF [sTNF-RI], sTNF-RII, and protein 1 type receptor of interleukin-1 [IL1RL1/sST2]) and the apoptosis marker related apoptosis-inducing ligand and tumor necrosis factor [sTRAIL] in thirty patients with dengue in the acute phase, early recovery phase and late recovery phase. These patients were classified according to the severity of the disease by the WHO criteria for dengue no warning signs, dengue warning signs and severe dengue and the type of infection in primary infection (PI) and secondary infection (SI). We included two control groups, ten healthy subjects (control) and eight with other febrile viral infection (OIVF). Circulating levels of cytokines were determined by ELISA and apoptosis by TUNEL method. PBMC cultures were stimulated or not with LPS for 24 hours. Our results showed a significant increase in most of the cytokines pro-and anti-inflammatory (TNF, IL-6, IL-12, IL-17, sTNF-RI, sTNF-RII, IL1RL1/sST2) and sTRAIL in serum of patients with dengue in the acute phase of the disease respect to the control group. Increased IL-6, sTNF-RI, sTNF-RII and IL1RL1/sST2 was associated with the severity of the disease, while IL-12 did not change during severe illness. The increase of sTRAIL was evident in the primary infection. The pattern of secretion of cytokines TNF and IL-1β in infected monocytes was similar when comparing the concentrations with the control group without stimulation. Furthermore, levels of IL-6 and IL-12 similar to the control group were enrolled. Monocytes from patients with dengue without LPS showed increased apoptotic cells (p<0.001) compared to the control. This increase in cytokine and apoptosis during the illness evidence participation of DENV in the activation and death of monocyte in vivo.