I. Martín de la Torre, Teresa García Lacarra, María del Rosario Martín de Santos
Se ha desarrollado una técnica de PCR en tiempo real, utilizando el agente intercalador fluorescente SYBR® Green, para la detección cuantitativa de la presencia de harinas de pescado en piensos. El método combina el uso de cebadores específicos de pescado que amplifican un fragmento de 87 pb del gen mitocondrial ARNr 12S, junto a cebadores universales que amplifican un fragmento conservado de 99 pb del gen nuclear ARNr 18S en el ADN de los organismos eucariotas. La técnica desarrollada permitió detectar y cuantificar hasta un 0,1% de ADN de pescado en mezclas experimentales de pescado/avena.
A quantitative polymerase chain reaction (PCR) assay using SYBR green detection system has been developed for detection of fishmeal in feedstuffs. The real-time PCR method combines the use of fish-specific primers that amplify a 87 bp fragment of the mitochondrial 12S ribosomal RNA gene from fish species, and universal primers that amplify a 99 bp fragment of the nuclear 18S ribosomal RNA gene from eukaryotic DNA. The PCR method developed was applied to fish tissues/oats binary mixtures demonstrating its suitability for the detection of fish DNA in mixtures containing as low as 0.1% of fish tissues.
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