Fue purificado una nueva PLA2, con actividad miotóxica del veneno de Micrurus spixii con un alto grado de pureza y homogeneidad molecular, mediante dos pasos cromatográficos: cromatografía de exclusión molecular G-75 (1 cm x 60 cm) y cromatografía liquida de alta presión de fase reversa (RP-HPLC). La electroforesis en SDS-PAGE muestra una masa molecular ~14 KDa, que fue confirmado por la espectrometría de masa MALDI-TOF con una masa molecular de 14149.005 Da. Esta nueva PLA2 mostró un potente efecto miotóxico local (vía intramuscular) así como sistémico (vena caudal) en ratones, a una concentración de 20ug/ml y una elevada actividad inflamatoria a una concentración de 5ug/ml. La reproductibilidad de la actividad biológica, a través de los efectos farmacológicos, solo es posible con la utilización de fracciones químicamente homogéneas que mantengan la integridad de la función biología.
A new PLA2, with myotoxic activity, was purified from de venom of Micrurus spixii, with a high degree of purity and molecular homogeneity by two chromatographic steps: molecular exclusion chromatography G-75 (1 cm x 60 cm) and high performance liquid chromatography pressure reverse phase (RP-HPLC). The SDS-PAGE electrophoresis shows a molecular mass ~ 14 kDa, which was confirmed by mass spectrometry MALDI-TOF with a molecular mass of 14149,005 Da. This new PLA2 showed a potent myotoxic local effect (intramuscular way) and systemic too (tail vein) in mice, at a concentration of 20ug/ml compared to other snake of the same gender and high inflammatory activity at a concentration of 5ug / ml. The reproducibility of biological activity through the pharmacological effects is only possible with the use of chemically homogeneous fractions that keep the integrity of the biology activity.
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