Resumen de Beta1-Integrin blockade prevents podocyte injury in experimental models of minimal change disease

Gabriel Miguel Cara Fuentes, Rakesh Verma, Madhusudan Venkatareddy, Colin Baker, Federica Piani, Sogut Turkmen Aksoy, Neha Vazzalwar, Gabriela E. Garcia, Mindy Banks, Flor Ángel Ordoñez Álvarez, María del Carmen de Lucas Collantes, Petter Bjornstad, Juan David González Rodríguez, Richard J. Johnson, Puneet Garg

• español

  Antecedentes: La activación de la quinasa de adhesión focal (FAK) en podocitos juega un papel en la patogénesis de la enfermedad de cambios mínimos (ECM), pero su mecanismo de activación en dicha enfermedad es desconocido. En este estudio investigamos si la inte- grina 1 de los podocitos modula la activación de FAK y del da ˜no podocitario en modelos experimentales de la ECM.

  Métodos: Utilizamos lipopolisacárido (LPS) y suero de pacientes con ECM para inducir da ˜no podocitario in vivo e in vitro, respectivamente. Realizamos estudios funcionales usando inhibidores específicos de la integrina 1 in vivo e in vitro, así como estudios histológicos, western blots y técnicas de inmunofluorescencia para evaluar cambios morfológicos y molec- ulares en podocitos. Usando ELISA medimos los niveles séricos de LPS en 35 ni ˜nos con ECM o sospecha de ECM (síndrome nefrótico idiopático [SNI]) y en 18 individuos sanos.

  Resultados: Los ratones inyectados con LPS desarrollaron cambios morfológicos (fusión de pedicelos, con apariencia normal de los glomérulos) y moleculares (pérdida de la expre- sión de sinaptopodina, cambio en la localización de la nefrina fosforilada y fosforilzación de FAK), que son característicos de la ECM en humanos. La administración de un inhibidor de la integrina 1 en ratones disminuyó la fosforilación de FAK, proteinuria y da ˜no podoc- itario que ocurre tras la inyección de LPS. En ni ˜nos con ECM/SNI, los niveles séricos de LPS fueron más elevados que en controles. En cultivos de podocitos humanos, la adicción de un inhibidor de la integrina 1 al suero de ni ˜nos con ECM en recaída evitó cambios en el citoesqueleto.

  Conclusiones: La integrina 1 de los podocitos actúa como mediador de la activación de la FAK y del da ˜no podocitario en modelos experimentales de la ECM.

• English

  Introduction: Activation of the focal adhesion kinase (FAK) in podocytes is involved in the pathogenesis of minimal change disease (MCD), but the pathway leading to its activation in this disease is unknown. Here, we tested whether podocyte 1 integrin is the upstream modulator of FAK activation and podocyte injury in experimental models of MCD-like injury.

  Methods: We used lipopolysaccharide (LPS) and MCD sera to induce MCD-like changes in vivo and in cultured human podocytes, respectively. We performed functional studies using spe- cific 1 integrin inhibitors in vivo and in vitro, and integrated histological analysis, western blotting, and immunofluorescence to assess for morphological and molecular changes in podocytes. By ELISA, we measured serum LPS levels in 35 children with MCD or presumed MCD (idiopathic nephrotic syndrome [INS]) and in 18 healthy controls.

  Results: LPS-injected mice showed morphological (foot process effacement, and normal appearing glomeruli on light microscopy) and molecular features (synaptopodin loss, nephrin mislocalization, FAK phosphorylation) characteristic of human MCD. Administra- tion of a 1 integrin inhibitor to mice abrogated FAK phosphorylation, and ameliorated proteinuria and podocyte injury following LPS. Children with MCD/INS in relapse had higher serum LPS levels than controls. In cultured human podocytes, 1 integrin blockade pre- vented cytoskeletal rearrangements following exposure to MCD sera in relapse.

  Conclusions: Podocyte 1 integrin activation is an upstream mediator of FAK phosphorylation and podocyte injury in models of MCD-like injury.