Resumen de Validación de un método por HPLC para fumonisina B1 en maíz utilizando fluorescamina como agente derivatizante
Ramón Sersa Espinosa, José Antonio Arias Verdes, Eyda Otero Fernández-Trevejo, Joan Arauce Calderíus
Se estudiaron y establecieron las condiciones cromatográficas para determinar fumonisina B1 por un método que combina la purificación por extracción en fase sólida con cartuchos SAX de intercambio iónico y la detección y cuantificación por HPLC-Fluorescencia empleando fluorescamina como agente derivatizante. Se probaron diferentes mezclas y proporciones de fase móvil, diferentes combinaciones de longitudes de onda de excitación y emisión y se estudió la cinética de formación del complejo fluorescente. Con las condiciones seleccionadas que establecen una mezcla de metanol-ácido acético 0,08 M en proporción (54:46) y combinaciones de longitud de onda de emisión y excitación en 460 y 385 respectivamente se construyó una curva de calibración con concentraciones entre 5 y 20 ng/nl con un coeficiente de regresión lineal de 0, 9983, la cual fue leída después de transcurrida 1 hora de reacción donde se observó la máxima respuesta y estabilidad del complejo fluorescente formado. Bajo estas condiciones se corrieron en paralelo 5 muestras sin contaminar para probar la efectividad del método donde no aparecen interferencias de la matriz y se definen y resuelven los picos de la fumonisina B1 y su derivado hidroxilado formado durante la reacción de derivatización, las que mostraron una contaminación media de 2 ppm. El recobrado medio se encontró entre 77.3 y 86,9 y la receptibilidad fue de 0,06 ppm. Los límites de detección y cuantificación se establecieron en 0,2 y 0,4 ppm. de FB1, respectivamente.
