Identificacion i caracterizacion de acuaporinas en vitis (richter-110)
- Autores: Isabel Baiges
- Directores de la Tesis: Albert Mas Barón (dir. tes.)
- Lectura: En la Universitat Rovira i Virgili ( España ) en 2000
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Lluís Arola Ferrer (presid.), José Manuel Guillamón Navarro (secret.), Andreu Palou Oliver (voc.), Ángel Antonio Carbonell Barrachina (voc.), Carlos Alcaraz (voc.)
- Materias:
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- Resumen
Las acuaporinas o canales de agua son unas proteinas de expresion ubicua cuya función es la de facilitar el transporte de agua a favor de gradiente a través de las membranas biológicas.
En esta tesis doctoral se ha estudiado la expresión de acuaporinas en el híbrido Richter-110(Vitis berlandieri x Vitis rupestris) por su mayor resistencia a la sequia posiblemente relacionada con el vigoroso crecimiento radicular.
Mediante RT-PCR se obtuvieron sondas especificas para la selección de clones positivos en una biblioteca de cDNA obtenida a partir de mRNA de hoja de Vitis Richter-110. El resultado fue la deteccion de 7 clones distintos de secuencia codificante completa y uno con la secuencia codificante parcial.
Las secuencias nucleotídicas completa y uno con la secuencia codificante parcial. Las secuencias nucleotídicas y polipeptídicas pueden obtenerse de la base de datos GENBANK. El analisis de la actividad transportadora se llevó a cabo mediante la expresión heteróloga en oocitos de Xenopus laevis y demostró que al menos tres de las proteinas analizadas son acuaporinas.
El estudio de la inducibilidad a nivel transcripcional desveló que dos de estos genes se regulan siguiendo ciclos circadianos siendo la expresión mayor durante la primera parte del día. La expresión genica de estos mismos dos genes en respuesta al estrés hídrico fue ligeramente distinta a los valores control. Mediante la utilización de anticuerpos policlonales se determinó el efecto del estrés hidrico y del acido abscisico(ABA) en la expresión de esta proteinas. El analisis de la expresión genica a nivel transcripcional en distintos tejidos de la planta se realizó mediante Northern inverso (Dot-Blot). Dos de los genes analizados se expresan predominantemente en tejidos radiculares. Se hipotetiza que en el caso de que ambos transcritos se expresen en celulas en expansion, este elevado nivel podria estar relacionado con el vigor del crecimiento de
